Фтизиатрия
doi: 10.25005/2074-0581-2019-21-3-467-471
КОМПЛЕКСНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ МОКРОТЫ ВПЕРВЫЕ ВЫЯВЛЕННЫХ БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЁЗОМ ЛЁГКИХ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЁЗА

Е.В. Дуденко, С. Сыдыкова

Лаборатория иммунологии и молекулярной биологии, Национальный центр фтизиатрии, Бишкек, Кыргызская Республика

Цель: использование полимеразной цепной реакции (ПЦР) в комплексном исследовании мокроты впервые выявленных больных туберкулёзом лёгких (ТБЛ) при контроле жизнеспособности микобактерий туберкулёза (МБТ) микробиологическим методом.

Материал и методы: объект исследования – 59 впервые выявленных больных ТБЛ при поступлении на лечение и 28 больных ТБЛ через два месяца после начала противотуберкулёзной химиотерапии. Материал исследования – мокрота больных ТБЛ. Выявление погибших и персистирующих МБТ отмечалось при положительном результате ПЦР (ПЦР+) и отсутствии роста МБТ на плотной питательной среде Левенштейна-Йенсена. Применялись наборы для выделения ДНК M. tuberculosis complex: «ДНК-сорб-В» и «Литех». Для амплификации применялись наборы «Политуб» и «АмплиСенс МБТ». Детекция продуктов амплификации проводилась электрофорезом в 1,7% агарозном геле в присутствии бромистого этидия.

Результаты: до лечения ПЦР+ выявлен у 52 (88,1%) из 59 обследованных больных ТБЛ, положительный результат посева (посев+) – у 34 (57,6%) пациентов, отсутствие роста МБТ имело место у 25 (42,4%) из 59 больных ТБЛ. Через 2 месяца химиотерапии ПЦР+ выявлен у 23 (82,1%) из 28 больных ТБЛ, посев+ – у 13 (46,4%) пациентов, отсутствие роста МБТ отмечено в 15 (53,6%) из 28 случаев ТБЛ.

Заключение: содержание погибших и персистирующих МБТ на фоне химиотерапии повысилось от 36,5% до 52,2%. Показана эффективность использования ПЦР мокроты при контроле жизнеспособности МБТ микробиологическим методом.

Ключевые слова: туберкулёз лёгких, полимеразная цепная реакция , микробиологический метод, жизнеспособность микобактерий туберкулёза , химиотерапия.

Скачать файл:

Литература
  1. Серёгина ВА, Будрицкий АМ. Современные возможности диагностики туберкулёза лёгких. Вестник ВГМУ. 2016;15(4):7-17.
  2. Соловьёва ТН, Козлова НВ, Елькин АВ, Барнаулов АО. Диагностика инфильтративного туберкулёза лёгких в современных условиях. Вестник СЗГМУ им. И.И. Мечникова. 2013;5(3):79-83.
  3. Селиванов ЕВ, Звягинцев ЕН. Место ПЦР исследований в своевременной и точной диагностике туберкулёза. Вестник лаборатории ДНК-диагностики. 2011;10:12-7.
  4. Costa P, Botelho A, Couto I, Viveiros M, Inacio J. Standing of nucleic acid testing strategies in veterinary diagnosis laboratories to uncover Mycobacterium tuberculosis complex members. Front Mol Biosci. 2014;1:1-18.
  5. Galimi R. Extrapulmonary tuberculosis: tuberculous meningitis new developments. Eur Rev Med Pharmaco. 2011;4:365-86.
  6. Sivokozov I, Shumskaya I, Lovacheva O, Evgushenko E, Chernousova L. Efficacy of endoscopic diagnostics in smear-negative TB. Eur Respire J. 2014;44:26-30.
  7. Иванов ПЛ, Леонов СЛ. Методика получения ДНК, пригодной для молекулярно-генетического исследования, из гепаринизированных образцов крови. Судебно-медицинская экспертиза. 2010;6:21-3.
  8. Севастьянова ЭВ, Пузанов ВА, Смирнова ТГ, Ларионова ЕЕ, Черноусова ЛН. Оценка комплекса микробиологических и молекулярно-генетических методов исследований для диагностики туберкулёза. Туберкулёз и болезни лёгких. 2015;1:35-41.
  9. Севастьянова ЭВ, Ларионова ЕЕ, Смирнова ТГ, Андриевская ИЮ, Андреевская СН, Черноусова ЛН. Оценка результатов выявления микобактерий, полученных различными методами исследования. Медицинский альянс. 2018;3:25-30.
  10. Singh S, Saluja TP, Kaur M, Khilnani GC. Comparative evaluation of FASTP assay with PCR and other conventional in vitro diagnostic methods for the early detection of pulmonary tuberculosis. J Clin Lab Anal. 2008;22(5):367-74.
  11. Севастьянова ЭВ, Черноусова ЛН. Современные алгоритмы микробиологической диагностики туберкулёза. Туберкулёз и болезни лёгких. 2018;96(7):11-7.
  12. Ekrami A, Samarbaf-Zadeh AR, Khosravi A, Zardar B, Alavi M, Amin M. Validity of bioconjugated silica nanoparticles in comparison with direct smear, culture and polymerase chain reaction for detection of mycobacterium tuberculosis in sputum specimens. Int J Nanomed. 2011;6:2729-35.
  13. Miotto P, Bigoni S, Migliori GB, Mattelli A, Cirillo DM. Early tuberculosis treatment monitoring by Xpert® MTB/RIF. Eur Respire J. 2012;39(5):1269-71.
  14. Velayat AA, Farnia P, Masiedi MR. Recurrence after treatment success in pulmonary multidrug resistant tuberculosis: predication by continual PCR positivity. Int J Clin Exp Med. 2012;5(3):271-2.
  15. Кондратьева ТК, Ажикина ТЛ, Шлеева МО, Капрельянц АС, Апт АС. Генетический контроль латентной туберкулёзной инфекции. Туберкулёз и социально-значимые заболевания. 2013;2:61-7.
  16. Попов СА, Сабгайда ТП, Можокина ГН. Лабораторная диагностика больных туберкулёзом с лекарственной устойчивостью возбудителя. Проблемы социальной гигиены, здравоохранения и истории медицины. 2016;24(5):272-6.
  17. Хоменко ДС, Тигиев АВ, Кампос ЕД. Эпидемиологические и клинико-рентгенологические особенности инфильтративного туберкулёза лёгких в Ростовской области. Журнал фундаментальной медицины и биологии. 2014;3:49-51.
  18. Савинцева ЕВ, Яковлева ЕА, Шевелёва СЛ, Гринько ОВ, Светлакова АА. Ретроспективный анализ методов диагностики – BACTEC, классический метод, ПЦР-метод. European Science. 2019;2:46-9.

Сведения об авторах:

Дуденко Елена Вячеславовна
старший научный сотрудник лаборатории иммунологии и молекулярной биологии, Национальный центр фтизиатрии
ORCID ID: 0000-0001-8948-3659

Сыдыкова Салтанат
научный сотрудник лаборатории иммунологии и молекулярной биологии, Национальный центр фтизиатрии
ORCID ID: 0000-0001-6479-2770

Информация об источнике поддержки в виде грантов, оборудования, лекарственных препаратов

Работа выполнялась в соответствии с планом НИР Национального центра фтизиатрии (номер государственной регистрации 0003059). Финансовой поддержки со стороны компаний-производителей лекарственных препаратов и медицинского оборудования авторы не получали.

Конфликт интересов: отсутствует

Адрес для корреспонденции:

Дуденко Елена Вячеславовна
старший научный сотрудник лаборатории иммунологии и молекулярной биологии Национального центра фтизиатрии

720020, Кыргызская Республика, г. Бишкек, ул. Ахунбаева, 90а

Тел.: +996 (554) 044011

E-mail: dudenko-1963@mail.ru

Материалы по тематике:

◄ Возврат к списку